1.1體外透皮吸收試驗(yàn)的流程和操作

體外透皮吸收試驗(yàn)通常分為以下幾個(gè)步驟：

（1）樣品制備：將待測(cè)樣品按照一定比例配制成試驗(yàn)用液體或藥膏。（2）制備皮膚：取自人類或動(dòng)物皮膚的標(biāo)本都可使用。人類皮膚標(biāo)本可符合國(guó)家和國(guó)際倫理學(xué)委員會(huì)條約的規(guī)定[13]，首選活體皮膚,也可使用證明是完整的非活性皮膚標(biāo)本。表皮層(酶、熱或化學(xué)分離的)或用植皮刀分離的厚皮膚(典型的是200pm~400μm厚)都可選取。但應(yīng)避免使用太厚的(約大于1mm)皮膚,除非化學(xué)品較特殊,需用整個(gè)皮膚層來(lái)測(cè)試。應(yīng)確定皮膚種類、解剖位置以及制備技術(shù)。要求每個(gè)試驗(yàn)樣品至少進(jìn)行四次重復(fù)試驗(yàn)。

（3）涂抹藥劑：將待測(cè)藥劑均勻涂抹于透皮細(xì)胞模型上。

（4）等待吸收：根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的要求，在一定時(shí)間內(nèi)等待藥劑在透皮細(xì)胞中發(fā)生吸收和代謝。（5）取樣分析：在不同的時(shí)間節(jié)點(diǎn)，用特定方法從透皮細(xì)胞模型上采集樣品，進(jìn)行分析和檢測(cè)。

1.2.影響透皮吸收的因素及調(diào)控方法

影響透皮吸收的因素主要包括物理、化學(xué)和生物學(xué)因素，如分子大小、分子量、溶解度、化學(xué)結(jié)構(gòu)、溫度、濕度、pH值等。為了準(zhǔn)確評(píng)價(jià)化妝品成分的透皮性能和毒理學(xué)效應(yīng)，需要對(duì)這些影響因素進(jìn)行有效的調(diào)控。

例如，可以通過(guò)改變涂抹面積、藥劑濃度、涂抹時(shí)間等參數(shù)，來(lái)控制藥劑的吸入速度和吸收程度。此外，還可以添加透皮增強(qiáng)劑或選擇合適的透皮細(xì)胞模型等方法，提高藥劑的滲透性和穿透力。同時(shí)，還需要對(duì)透皮細(xì)胞模型進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，以保證試驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。

二、體外透皮吸收試驗(yàn)的常用模型

體外透皮吸收試驗(yàn)常用的模型主要包括以下幾種：

2.1.人工合成膜模型

人工合成膜模型是一種采用合成材料制成的模型，其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)可以通過(guò)調(diào)整材料成分、厚度等因素進(jìn)行控制。這種模型具有批量生產(chǎn)、價(jià)格低廉、易于操作、可重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但由于其與真實(shí)皮膚存在差異，透皮透過(guò)性和毒理學(xué)評(píng)估結(jié)果可能存在誤差。

2.2.動(dòng)物皮膚模型

動(dòng)物皮膚模型是使用動(dòng)物組織制作的模型，其結(jié)構(gòu)和功能與真實(shí)皮膚比較接近。這種模型具有較好的透皮透過(guò)性和可靠性，但受到動(dòng)物福利等倫理問(wèn)題的限制，同時(shí)也存在動(dòng)物皮膚與人類皮膚之間存在差異的問(wèn)題。

2.3.人類皮膚模型

人類皮膚模型是使用人類皮膚組織制作的模型，其結(jié)構(gòu)和功能與真實(shí)皮膚非常相似。這種模型具有很好的代表性和可靠性，能夠更好地預(yù)測(cè)化妝品在人體中的行為和影響。然而，由于制備和操作成本較高，限制了其在實(shí)踐中的應(yīng)用。

不同種屬動(dòng)物皮膚的特點(diǎn)對(duì)比如下：

三、體外透皮吸收試驗(yàn)選擇技術(shù)指標(biāo)

2021年3月，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心（Center for Drug Evaluation, CDE）發(fā)布了《皮膚外用化學(xué)仿制藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》，明確了體外透皮試驗(yàn)的設(shè)計(jì)目的是模擬外用藥物在生理?xiàng)l件下的透皮過(guò)程，以反映外用制劑的質(zhì)量。

在試驗(yàn)設(shè)計(jì)方面，相比于2018年發(fā)布的《新注冊(cè)分類皮膚外用仿制藥的技術(shù)評(píng)價(jià)要求（征求意見(jiàn)稿）》，新版指導(dǎo)原則刪除了原附件的內(nèi)容，并提出“體外透皮試驗(yàn)建議參考國(guó)內(nèi)外相關(guān)指導(dǎo)原則開(kāi)展相關(guān)研究工作”。

四、體外透皮吸收試驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)

4.1.體外透皮吸收試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)包括：

（1）低成本：相對(duì)于動(dòng)物試驗(yàn)和臨床試驗(yàn)，體外透皮吸收試驗(yàn)具有較低的成本，并且不需要大量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人員參與。

（2）高通量：體外透皮吸收試驗(yàn)可以進(jìn)行高通量篩選，同時(shí)可以同時(shí)測(cè)試多種不同的化妝品成分和配方，快速確定其透皮性能和毒理學(xué)效應(yīng)。

（3）可替代動(dòng)物試驗(yàn)：由于動(dòng)物試驗(yàn)受到倫理和法律等限制，體外透皮吸收試驗(yàn)可以作為動(dòng)物試驗(yàn)的替代方法，以預(yù)測(cè)化妝品成分在人體內(nèi)的代謝和毒理學(xué)效應(yīng)。

4.2.體外透皮吸收試驗(yàn)也存在一些缺點(diǎn)，包括：

（1）不能反映內(nèi)部毒理學(xué)效應(yīng)：體外透皮吸收試驗(yàn)只能模擬化妝品成分在皮膚表層的滲透和吸收情況，無(wú)法反映其在體內(nèi)的代謝和毒理學(xué)效應(yīng)。

（2）無(wú)法模擬真實(shí)使用場(chǎng)景：體外透皮吸收試驗(yàn)所采用的透皮細(xì)胞模型和試驗(yàn)條件可能與真實(shí)使用場(chǎng)景存在差異，因此其結(jié)果可能不能完全代表化妝品在人體內(nèi)的真實(shí)行為和影響。

（3）結(jié)果可信度受到影響：體外透皮吸收試驗(yàn)中涂抹面積、透皮時(shí)間、涂抹劑量等參數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化和控制，以及透皮細(xì)胞模型的選擇和處理等因素，都可能會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的可靠性產(chǎn)生影響。

綜上所述，體外透皮吸收試驗(yàn)具有低成本、高通量和可替代動(dòng)物試驗(yàn)等優(yōu)點(diǎn)，但同時(shí)也存在一些缺點(diǎn)，如無(wú)法反映內(nèi)部毒理學(xué)效應(yīng)、無(wú)法模擬真實(shí)使用場(chǎng)景和結(jié)果可信度受到影響等。因此，在進(jìn)行化妝品安全性評(píng)估時(shí)，需要綜合考慮各種試驗(yàn)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，并采用多種試驗(yàn)方法相結(jié)合的策略，以最大程度地提高評(píng)估結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。

五、體外透皮吸收試驗(yàn)的應(yīng)用領(lǐng)域

體外透皮吸收試驗(yàn)是一種常用的安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法，主要應(yīng)用于以下領(lǐng)域：

5.1.化妝品安全性評(píng)估：透皮吸收試驗(yàn)被廣泛用于化妝品成分的透皮性能和毒理學(xué)效應(yīng)評(píng)估中。通過(guò)體外透皮試驗(yàn)可預(yù)測(cè)不同化妝品成分在人體內(nèi)的滲透情況和可能產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，為化妝品的安全性評(píng)估提供參考依據(jù)。

5.2.藥物透皮吸收研究：藥物的透皮吸收是其治療作用的關(guān)鍵因素之一。透皮吸收試驗(yàn)可以模擬藥物在人體表面的滲透和吸收過(guò)程，并分析其透皮性能參數(shù)，為藥物研發(fā)和臨床使用提供數(shù)據(jù)支持。

5.3.食品添加劑透皮吸收評(píng)價(jià)：食品添加劑在食品中的使用越來(lái)越廣泛，其對(duì)人體健康的影響備受關(guān)注。透皮吸收試驗(yàn)可以評(píng)估食品添加劑在人體皮膚上的滲透和吸收情況，為食品添加劑的安全性評(píng)估和管控提供參考依據(jù)。

5.4醫(yī)療器械進(jìn)行透皮吸收評(píng)價(jià)：主要關(guān)注醫(yī)療器械在使用過(guò)程中與皮膚接觸時(shí)，其成分或釋放的物質(zhì)通過(guò)皮膚吸收的程度，并可能對(duì)人體產(chǎn)生的影響。醫(yī)療器械進(jìn)行透皮吸收評(píng)價(jià)是為了確保其在臨床使用中的安全性和有效性，同時(shí)滿足法規(guī)要求并為科學(xué)研究提供重要數(shù)據(jù)。這對(duì)于保障患者的健康權(quán)益和促進(jìn)醫(yī)療器械行業(yè)的發(fā)展具有重要意義。